CRISPR創(chuàng)造了第一個對免疫系統(tǒng)功能性“隱身”的多能干細(xì)胞

2019-02-20 15:31:06 admin 60

加州大學(xué)舊金山分校的科學(xué)家們利用CRISPR-Cas9基因編輯系統(tǒng)創(chuàng)造了第一個對免疫系統(tǒng)功能性“隱身”的多能干細(xì)胞,這是生物工程的一項壯舉,有助于幫助實驗室研究防止干細(xì)胞移植排斥的出現(xiàn)。這些“通用”干細(xì)胞比為每位患者量身定制的干細(xì)胞更有效地完成個性化醫(yī)療,實現(xiàn)再生醫(yī)學(xué)。

這一研究成果公布在2月18日的Nature Biotechnology雜志上,由加州大學(xué)舊金山分校心臟外科主任Julien I.E. Hoffman博士等人領(lǐng)導(dǎo)完成, Hoffman博士說,“科學(xué)家經(jīng)常吹噓多能干細(xì)胞的治療潛力,比如說它可以形成任何成體組織,但是免疫系統(tǒng)不這么認(rèn)為,它一直都是安全有效進(jìn)行干細(xì)胞治療的主要障礙之一?!?/span>

免疫系統(tǒng)一方面能保護(hù)我們免受外來入侵物的傷害,如果沒有它,我們?nèi)梭w無法正常運(yùn)行;但另外一方面,這也意味著移植的器官,組織或細(xì)胞會被認(rèn)作是具有潛在危險的外來物,因此會引發(fā)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng),導(dǎo)致移植排斥,這也就是臨床上所說的“組織相容性不匹配(histocompatibility mismatched)”。

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為此我們只能服用抑制免疫活性并減少排斥反應(yīng)的藥物。但不幸的是,這些免疫抑制劑使患者更容易感染和患上癌癥。

干細(xì)胞移植領(lǐng)域科學(xué)家曾經(jīng)認(rèn)為排斥問題可以通過誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSCs)解決,這種干細(xì)胞是由完全成熟的細(xì)胞(如皮膚或脂肪細(xì)胞)重新編程得來的,可以發(fā)育成任何構(gòu)成身體組織和器官的細(xì)胞。如果將來自iPSCs的細(xì)胞移植到捐獻(xiàn)原始細(xì)胞的同一患者體內(nèi),那么人們會認(rèn)為移植的細(xì)胞是“自我”,不會發(fā)生免疫攻擊。

但實際上,iPSC的臨床應(yīng)用已證明這很困難。由于尚未了解的原因,許多患者的細(xì)胞被證明無法進(jìn)行重編程,而且為每位進(jìn)行干細(xì)胞治療的患者生產(chǎn)iPSC既昂貴又耗時。

“iPSC技術(shù)存在許多問題,但最大的障礙是質(zhì)量控制和可重復(fù)性。我們不知道是什么讓一些細(xì)胞能夠重新編程,但大多數(shù)科學(xué)家認(rèn)為這還是不太可靠。因此,大多數(shù)個體化iPSC治療方法已被放棄?!?/span>

為此,研究人員嘗試通過創(chuàng)建“通用”iPSC來回避這些問題,在最新研究中,他們發(fā)現(xiàn)在僅僅三個基因的活性被改變后,將iPSC移植到具有完全免疫系統(tǒng)功能組織相容性不匹配的受體后能夠避免排斥。

“這是第一次有人設(shè)計出可以普遍移植,在免疫功能正常的受體中存活而不會引起免疫反應(yīng)的細(xì)胞,”作者表示。

具體來說,研究人員首先利用CRISPR刪除兩個基因,這兩個基因?qū)τ谥饕M織相容性復(fù)合體(MHC)I類和II類蛋白質(zhì)家族的正常功能至關(guān)重要。MHC蛋白質(zhì)位于幾乎所有細(xì)胞的表面,攜帶幫助免疫系統(tǒng)區(qū)分入侵者與本體的分子信號。缺少M(fèi)HC基因的細(xì)胞不會出現(xiàn)這些信號,因此它們不會標(biāo)記外來者。然而,缺失MHC蛋白的細(xì)胞會成為自然殺傷(NK)細(xì)胞這種免疫細(xì)胞的靶標(biāo)。

加州大學(xué)舊金山分校的Lewis Lanier教授是一位信號學(xué)專家,其研究組曾發(fā)現(xiàn)CD47(一種細(xì)胞表面蛋白)能作為針對巨噬細(xì)胞的“別吃我”信號,對NK細(xì)胞也有很強(qiáng)的抑制作用。

研究人員認(rèn)為CD47可能是完全關(guān)閉排斥反應(yīng)的關(guān)鍵,因此他們將CD47基因加載到一種病毒中,傳遞給MHC蛋白缺失的小鼠和人體干細(xì)胞。

實驗結(jié)果證實了他們的假設(shè),CD47確實是這個難題的缺失部分。當(dāng)研究人員將三重修飾過的小鼠干細(xì)胞移植到具有正常免疫系統(tǒng)的錯配小鼠時,結(jié)果沒有觀察到排斥反應(yīng)。然后,他們又將類似調(diào)整過的人類干細(xì)胞移植到所謂的人源化小鼠體內(nèi),這些小鼠的免疫系統(tǒng)已經(jīng)被人體免疫系統(tǒng)的成分所取代,也沒有排斥反應(yīng)。

此外,研究人員利用這些干細(xì)胞中分化出各種類型的人類心臟細(xì)胞,并將它們再次移植到人源化小鼠體內(nèi)。干細(xì)胞分化的心肌細(xì)胞能夠?qū)崿F(xiàn)長期存活,甚至開始形成基本的血管和心肌,這為修復(fù)衰竭心臟帶來了希望。

“我們的技術(shù)解決了干細(xì)胞和干細(xì)胞衍生組織的排斥問題,這是干細(xì)胞治療領(lǐng)域的一大進(jìn)步,”Deuse說。 “我們的技術(shù)可以使更多的患者受益,其生產(chǎn)成本遠(yuǎn)低于其它任何個性化方法。我們只需要制造我們的細(xì)胞一次,得到的產(chǎn)品可以廣泛應(yīng)用。